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馬傳染性貧血病毒PCR檢測試劑盒說明書

簡要描述:馬傳染性貧血病毒PCR檢測試劑盒說明書上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:粗柄羊肚菌 Morchella crassipas異常漢遜酵母 Hansenula anomala

人臍靜脈平滑肌細胞尖孢鐮刀菌 Fusarium oxysporum

植物桿菌 Lactobacillus plantarum光帽鱗傘 Pholiota nameko

人腎上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

  • 產(chǎn)品型號:50次
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-17
  • 訪  問  量:304

詳細介紹

技術(shù)原理:
 DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。

注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

 馬傳染性貧血病毒PCR檢測試劑盒說明書

 Equine Infectious Anemia Virus(EIAV)RTPCR

BK-P9140

原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
?
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

胰凝蛋白酶(含100mL酶解緩沖)10mL

4T1(小鼠腺細胞)褐球固氮菌(需一周準(zhǔn)備) Azotobacter chrooccum

LncaP, 人前列腺細胞

伊紅美蘭瓊脂/EMB瓊脂/伊紅美藍瓊脂/曙紅亞甲藍瓊脂/伊紅次甲基藍瓊脂/EMB Agar腸道致病菌的分離,亦可用于大腸埃希氏菌的分離和鑒別250克國產(chǎn)/進口

粗柄羊肚菌 Morchella crassipas異常漢遜酵母 Hansenula anomala

人臍靜脈平滑肌細胞尖孢鐮刀菌 Fusarium oxysporum

植物桿菌 Lactobacillus plantarum光帽鱗傘 Pholiota nameko

人腎上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

MDBK(牛腎細胞)5×106cells/瓶×2

Romas(人淋巴瘤細胞)中慢生華癸瘤菌 Mesorhizobium huakuii

人胃腸道間質(zhì)瘤細胞英文名稱:GIST

馬傳染性貧血病毒PCR檢測試劑盒說明書1,3-雙(2,4,6-*)氯咪唑  340.9  1,3- bis (2,4,6- three)*:141556-45-8分子量: C21H25ClN2

(L-酸鈷-己內(nèi)酯-乙交酯鈷)    Poly (L- lactic acid co caprolactone co glycolide)*:134490-19-0分子量:

正丁亞砜  162.29  Butyl dimethyl*:2168-93-6分子量: C8H18OS

二氧硒  Two selenium oxide  110.96分子量: SeO2*:2025852

二甲黃  Two methyl yellow  225.29分子量: C14H15N3; C6H5N=NC*:22227

荊芥油  Catnip oil  分子量:*:

花椒毒酚  Prickly ash  202.16分子量:C11H6O4*:

鄰二甲酸氫鉀  204.22  O two formic acid*:877-24-7分子量: C8H5KO4; HOOCC6H4COOK

2--3-甲-5-溴吡  187.04  2- amino -3- -5-*:3430-21-5分子量: C6H7BrN2

鄰氯甲  126.58  Ortho chlorine toluene*:95-49-8分子量:95-49-8

亞酰  220.01  Sub - iodine*:536-80-1分子量: C6H5IO

 

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